Ice-Bath Free Fast Transfer Buffer

Descriptions

✅ 안전하고 무독성

• 본 제품은 유해하거나 독성이 있는 성분을 포함하지 않습니다.
• 고독성 metanol 등의 시약을 사용할 필요가 없습니다.

✅ 기존 Transfer buffer와 동등하거나 더 우수한 성능

• 본 제품은 기존의 일반적인 전이 버퍼와 비교하여 동일하거나 더 뛰어난 단백질 전이 효과를 제공합니다.

✅ Icabath 없이 빠른 단백질 전이

• 본 제품을 사용하면 icebath 없이 400mA의 일정한 전류 조건에서 15~30분 만에 단백질을 transfer할 수 있습니다.
• 기존 전이 버퍼보다 열 발생이 적어 실험 과정에서 과열로 인한 단백질 변성을 최소화할 수 있습니다.

Protocol

1. 1× 작동 용액(Working Solution) 제조 방법

1. 10x ice-bath free fast transfer buffer 100mL를 준비합니다.
2. 600mL의 탈이온수 또는 증류수를 추가하여 잘 혼합합니다.
3. 200mL의 무수 에탄올(100% ethanol)을 추가한 후 다시 잘 혼합합니다.
4. 최종 부피가 1L가 되도록 탈이온수 또는 증류수를 추가한 후 충분히 혼합하여 1× 작동 용액을 완성합니다.

2. 단백질 전이 과정

1. 샌드위치 구조를 완성합니다.
   • 배치 순서 (음극(검은색) → 양극(빨간색)):
     스펀지 → Filter → 젤 → membrane(PVDF 또는 NC) → Filter → 스펀지
2. Transfer tank에 배치하고 Ice-bath 없이 빠른 transfer buffer를 추가합니다.
3. 전류 400 mA로 설정 후 15~30분 동안 transfer를 수행합니다.
   • Transfer 시간이 30분 이상일 경우 icebath상에서 transfer해줘야 합니다. 해당 buffer는 열 발생을 최소화 시키나, 30분이 넘어가게 되면 단백질 변성에 영향을 끼칠 수 있는 온도변화가 있을 수 있습니다.
   • 젤 두께에 따른 전이 시간 조정
     • 0.75mm: transfer 시간 단축
     • 1.0mm: 기본 조건 (15~30분)
     • 1.5mm: transfer시간 연장

3. 전류 및 transfer 조건

4. 주의사항

1. 준비된 작동 용액은 가능한 한 빨리 사용하세요. 실험실용 초순수(G4701-500ML)로 희석할 것을 권장합니다.
2. 본 제품은 Tris-Gly, Bis-Tris 등 다양한 PAGE 젤 전이 시스템에 적합합니다.
3. PVDF 막은 사용 전 약 30초간 무수 에탄올(100% ethanol)에 담가 활성화하세요.
4. transfer 시간이 30분 이내일 경우 아이스 배스가 필요하지 않으나, 30분을 초과하는 경우 아이스 배스를 사용해야 합니다.
5. 전원 공급 장치의 브랜드와 모델에 따라 최대 전류 및 출력이 다를 수 있습니다.
   • 일부 전원 공급 장치는 400mA 설정 시 과부하 보호가 발생할 수 있으므로, 전류를 낮추거나 더 높은 출력의 전원을 사용해야 합니다.
6. 전이 버퍼 온도, 젤 두께, 아크릴아마이드 농도, 이온 농도, 여과지 두께, 전이 버퍼 사용 횟수 등이 전류와 전압에 영향을 줄 수 있습니다.
   • 과부하 발생 시 전류를 줄이고 전이 시간을 늘리는 방법을 고려하세요.
7. 제품의 정상적인 색상은 무색 투명이며, 만약 갈색 또는 황갈색으로 변할 경우 즉시 폐기하세요.
8. 저온 환경에서는 결정이 생길 수 있으나 이는 정상적인 현상입니다.
   • 결정이 생길 경우 약간 가열하거나, 자기 교반(Magnetic Stirring)을 사용하여 완전히 녹인 후 사용하세요.

 Shipping and Storage Conditions

 Ship with wet ice; Store at Room Temperatue, valid for 12 months.